产品货号:
KFS338
中文名称:
细胞毒性检测试剂盒(FM、HCS法)
英文名称:
产品规格:
1000T
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1~3天
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高内涵成像为细胞不同群体在空间分辨率和多参数设置上的分析,特别是在细胞应激和死亡分析上,提供了更多更丰富的数据研究,且使用更为便利。细胞活力的测定是细胞毒性研究的重要方面。
Hoechst33342是一种细胞膜通透性的小沟结合DNA染料,结合后发出明亮的蓝色荧光,相当易溶于水,细胞毒性小。它们可被大多数常用的荧光光源所激发,表现出相对较大的斯托克斯位移(激发/发射波长约为350/460nm),因此适合于多色标记实验。
绿色死细胞核酸染料(Ex/Em:502/525nm,bound to DNA)是一种可轻易穿过受损细胞质膜而不能透过活细胞质膜的绿色核酸染料,其在于核酸结合之后荧光强度会得到超过500倍的显著增强。
组分 | 规格 |
死细胞绿色染料(1mM) | 25μL |
Hoechst33342(10mg/mL) | 250μL |
保存:-20℃,避光,有效期1年。
临用前,配制染色工作液,配制染色工作液,以一张板96孔为例:
配制细胞染色液A——取2.1μL死细胞绿色染料加入到6mL培养细胞所用的完全培养基中,混匀避光放置,混匀避光放置。
配制细胞染色液B——取24μL的Hoechst33342加入到12mL的4%多聚甲醛-PBS中,混匀避光放置。
以下操作是针对96孔板培养的HeLa细胞设计,对于其他类型细胞,可能需要进行适当的优化条件。
- 正常培养细胞至所需要的密度,以125μL总体积添加合适浓度的感兴趣研究用测试化合物。(注意:如涉及DMSO,活细胞培养中所添加DMSO的浓度不应高于0.5%)
- 在测试用化合物或者药物处理结束之后,不要移去用的孵育培养基。
- 每孔直接添加50μL细胞染色液A,以每孔总体积为172μL和正常培养细胞所用的条件,避光孵育30分钟。
- 移去培养基。
- 每孔添加100μL的细胞染色液B。室温避光孵育15分钟。
- 移去染色液B,PBS洗涤一次。
- 每孔加入100μL的PBS,拍照分析
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